PCR Array检测服务

1. 什么是PCR芯片？

PCR array亦被称为功能分类芯片或PCR列阵，它结合了实时定量PCR技术灵敏可靠的优势以及微阵列技术同时检测多种基因表达量的优势，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。PCR array使用荧光定量PCR的方法，原理简单，全部引物经过实验验证，结果可靠，兼容性好。在一张96孔或384孔板上可同时对某个信号通路或某生物学功能相关的84个或372个重要基因、miRNA、lncRNA的表达量变化进行检测（其余为对照样本孔）。

其应用领域十分广泛，主要有肿瘤、免疫、发育、代谢、干细胞、细胞生物学、细胞信号通路、心血管疾病、miRNA靶基因等。可用于检测的物种主要是人类(Homo sapiens)，小鼠(Mus musculus)，大鼠(Rattus norvegicus)和恒河猴(Rhesus macaque)，其他物种可进行订制。

2. 为什么要使用PCR芯片？

实时定量PCR通过实时监测荧光染料的信号变化可反映出样品中的基因拷贝数，并且实时定量PCR线性范围广（能达到5个数量级），因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是，由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因，因而每次实验只能检测少数几个基因的表达水平，若要检测大量基因，则工作量巨大，耗时长久。通过经过优化的实时定量PCR体系，PCR芯片随之开发出来，研究者可以同时研究大量基因，既可以进行某些特别感兴趣的信号通路的研究，也可以作为验证芯片、高通量测序等结果的方法。

3. PCR芯片的应用场景

● 对某一信息通道（如细胞凋亡信息通道）的相关基因进行表达谱分析。
● 对某一疾病（如 II型糖尿病）的相关基因进行表达谱分析。
● 对某一生物性状（如水稻品质）的相关基因进行表达谱分析。
● 通过 DNA 芯片或其它手段锁定几十个目标基因，需要通过定量PCR 进行验证。
● 比较不同实验条件或不同生理条件下几十个感兴趣的基因的表达谱的变化。
● 通过现代实验方法如 siRNA沉默技术抑制某个功能基因的表达，或通过表达载体引入一个功能基因，分析几十个感兴趣的基因的表达谱的变化。
● 对细菌、病毒等病原体的多种基因及寄主与之相互作用的基因的表达谱分析。
● 对全球各实验室积累的大量基因表达数据进行有针对性的统计分析，提出科学假设，找出跟假设相关的几十个基因，应用 PCR芯片进行验证。
● miRNA定量分析。-NEW!
● 确定microRNA 的靶基因。-NEW!
● 长链非编码RNA表达谱分析。-NEW!
● 环状RNA表达谱分析。-NEW!
● 其他应用。

4. PCR芯片的优越性

与DNA芯片相比：采用实时荧光PCR方法，线性范围宽、可以直接定量、结果可靠。
与普通RT-PCR相比：省去引物设计、合成、验证和逐一分配到PCR板上的步骤，大大提高您的工作效率。

◆ 聚焦主题 — 按主题选择几十到几百个基因，聚焦您的研究主题。种类齐全，提供1500种以上的PCR芯片产品；您也可以根据需要定制您感兴趣的主题PCR芯片。
◆ 操作便捷 — 只需混合PCR Master Mix、cDNA 及ddH2O并分配上板，仅用5分钟手动时间，不到3小时即可完成从组织细胞处理到靶向基因检测的整个实验流程，真正为研究者带来方便。
◆ 灵敏度高 — 低至25 ng RNA的上样量可达85%以上的检出率， 8个数量级宽的动态范围，可同时检测表达差异大的基因。
◆ 结果可靠 — 引物经过精心设计，均一的PCR扩增效率，线性关系好，优异的重复性，经过反复验证，严格的质控体系，10万级的GLP标准的洁净实验室，杜绝交叉污染，数据分析细致严谨。
◆ 反应迅速 — 现货1周发货，定制2-4周发货，芯片服务可在一个月内完成。

5. PCR的实验流程

首先将RNA样品反转录为cDNA第一链，作为PCR模板；接着，将模板加入到反应体系（RT2 Real-TimeTM SYBR Green PCR Master Mix）中。在已经固定好基因特异性引物的96孔板各孔中，加入等量的PCR反应体系，进行PCR反应。采用仪器配套的软件计算PCR芯片中的每个基因的循环阈值（Ct）。最后，采用△△Ct方法比较对应的两个样本中同一基因的表达量变化。通过分析看家基因Ct值的一致性，可确定合适的标准化方法。芯片所设置的对照，可以检测PCR体系中是否存在DNA污染，或者是否有影响反转录或PCR实验步骤的因素存在。