一、腺病毒简介

腺病毒(Adenovirus)是一种无包膜的双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂，基因组的两端各有约100 bp的反向末端重复序列(inverted terminal repeat，ITR)，ITR 与末端蛋白(TP)相结合，与基因组复制及早期基因的转录有关，直径为90-100 nm，衣壳呈廿面体。

我们提供重组腺病毒（Ad5）、嵌合型腺病毒（Chimeric adenovirus）、以及Gutless腺病毒包装服务。Ad5病毒的感染是通过病毒颗粒表面的纤突（Fiber）与细胞表面受体CAR（Coxsackie virus and adenovirus receptor）特异性结合而介导的，在某些不表达或者低表达CAR的细胞种类上的应用受限。嵌合型腺病毒，它的感染是通过嵌合型纤突（Chimeric fiber）与细胞表面分子CD46特异性结合而介导的。

 

二、原理流程

我们常规使用的Ad5腺病毒包装系统包括1个含有缺失了E1/E3基因的腺病毒基因组序列的转移质粒（Transfer plasmid）和1个表达E1基因的包装细胞（adenoviral E1-expressing cell line），其包装流程是通过内切酶PacI将携带目的基因（Gene of Interest，简称GOI）的转移质粒线性化。线性化的质粒DNA随后转染到包装细胞中，E1基因的表达产物激活转移质粒上的腺病毒基因的表达（E3基因的缺失不影响腺病毒的包装），产生重组腺病毒颗粒，再经扩增、纯化与质检得到即用型的重组腺病毒。


 

三、腺病毒的应用

腺病毒具有感染分裂和非分裂细胞、免疫原性强（可诱导体液和细胞免疫应答，有益于疫苗开发）、基因容量大（8kb）、感染效率极高（全面超越其他病毒载体工具和脂质体转染）、感染范围广（几乎所有细胞）、表达能力强的特点，它通过受体介导的内吞作用进入细胞内，然后将腺病毒基因组转移至细胞核内，保持在染色体外，不整合进入宿主细胞基因组中。这些特性使腺病毒作为用于基因治疗的转基因载体、疫苗载体和溶瘤病毒疗法中使用的载体。

2、shRNA、miRNA、lncRNA等表观遗传学的研究；

3、基因编辑；

4、基因敲除；

5、药物研究。

四、交付内容
 

• 目的腺病毒；
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• COA等报告文件。

五、优势特点
 

• 1、复制缺陷型病毒不会造成二次感染，不整合基因组，使用较为安全；
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• 2、接近100%的极高的感染效率，全面超越各种载体及转染试剂；
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• 3、广泛的感染范围，几乎可以感染所有细胞，包括原代细胞；
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• 4、可以自己用包装细胞进行扩增，节约成本；
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• 5、容易制得高滴度病毒载体；
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• 6、可携带高至8kb的超大基因片段；
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• 7、方便获取上下游相关服务，如基因合成，载体构建等。

参考文献
 

[1] Lee CS, Bishop ES, Zhang R, et al. Adenovirus-mediated gene delivery: Potential applications for gene and cell-based therapies in the new era of personalized medicine[J]. Genes & Diseases, 2017, 4( 2):43-63.
 

[2] Jt S, M H, Wam B, et al. Adenoviral vectors for cardiovascular gene therapy applications: a clinical and industry perspective.[J]. J Mol Med (Berl), 2022;100(6):875-901.
 

[3] Singh S, Kumar R, Agrawal B. Adenoviral Vector-Based Vaccines and Gene Therapies: Current Status and Future Prospects[M]. 2018.