一、单克隆抗体简介

抗体(antibody)是一种通过效应B细胞（浆细胞）分泌，用来鉴别和清除外源物质如细菌、病毒等的一种“Y”形免疫球蛋白。单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）就是指由单一B细胞（其基因仅能编码一种抗体）克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常，天然抗体具有2条较长、相对分子量较大的重链（H链），以及2条较短、相对分子量较小的轻链（L链）。链间由二硫键和非共价键连接形成一个的单体分子，分为恒定区（C区）和可变区（V区）两部分。
 

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二、原理流程

1975年，Kohler等首次通过杂交瘤技术成功获得了具有抗原特异性的鼠源性单克隆抗体，从而开启了单克隆抗体开发的新纪元。单克隆抗体的发展经历了：鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体等发展阶段。

传统的小鼠单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。鼠单克隆抗体可针对单一抗原决定簇，特异性高，传代稳定，可大规模重复生产，在基础研究、医学诊断、肿瘤靶向治疗、放射免疫显影等多个领域有着广泛的应用。

兔单克隆抗体具有更高的亲和力和特异性、可识别更多表位、可识别小鼠抗原等优点。兔mAb皮摩尔级的亲和力水平为临床诊断及治疗提供了更高的灵敏度，降低抗体用量的同时，也降低了药物副作用。此外，对小分子物质和精细表位的出色识别能力，也让兔单抗在免疫诊断试剂和抗体药开发中越来越受欢迎，特别是在免疫组织化学、肿瘤检测及靶向治疗方面。

嵌合抗体是通过基因工程技术，将动物源抗体的可变区与人源抗体的恒定区结合。最常见的类型是人-鼠嵌合抗体，即抗体的可变区来自小鼠抗体，而恒定区则来自人的抗体。这样的抗体既保持了原来单克隆抗体的特异性和亲和力，又大大减少了在人体内的免疫原性。

人源化抗体是在嵌合抗体的基础上进一步扩大抗体的人源性区域，人源化比例可达80%-90%，使得抗体在应用过程中降低人体的异源排斥反应。抗体人源化涉及多种方法，包括CDR移植、回复突变、表面重塑、SDR移植等。目前的人源化方法通常采用CDR移植技术，辅以其他技术手段的综合性方法。

全人源化抗体是指抗体的基因序列全部来自人类。主要通过抗体展示技术和转基因小鼠技术，将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中，动物免疫后直接产生全人源化的抗体。
 

基于单B细胞的抗体发现，是最新的单抗发现技术。这种技术结合了单细胞分离鉴定技术和高通量测序技术，以单个B细胞为起始点，快速获得抗原特异性抗体，适用于多个动物物种，抗体发现效率高、处理通量高。获得的抗体具有丰富的基因多样性，可以为抗体药开发，提供更多的候选抗体分子，与全人源小鼠的快速免疫相结合、或使用康复病人的样本进行筛选，最短可以在1个月拿到全人抗体分子。

三、单克隆抗体的应用

与多克隆抗体相比，单克隆抗体针对单一的抗原表位，具有特异性更强，灵敏度更高的特点。使用单克隆抗体可免除不同细胞及微生物种或株间血清学上的交叉反应,大大提高诊断的特异性及敏感度。

同时，单克隆抗体在研究细胞表面标志、提纯可溶性抗原、进一步研究抗体的结构和功能、 抗体药物研究等方面都起到十分重要的作用。抗体作为必不可少的研究工具，不同科学领域的研究人员能够根据抗体来定义、识别、定位和/或量化蛋白靶点。

1、蛋白质定性/定量检测；

2、免疫成像与蛋白定位；

3、医学检验诊断试剂；

4、蛋白质的纯化；

5、药物靶向治疗。

四、交付内容

1、全长抗体序列；

2、重组质粒；

3、纯化得到的单克隆抗体；

4、相关报告文件。

五、服务优势

1、无需骨髓瘤细胞商业化授权；

2、最快24h就能得到筛选结果，2个半月就能完成从筛选到抗体表达制备；

3、高通量筛选平台，抗体经过体内成熟，亲和力好；

4、结合人源化小鼠或病人样本，可快速筛选全人源化抗体；

5、可灵活选择，筛选多种形式的抗体，及表达规模；

6、方便获取从抗体筛选、载体构建、抗体表达及稳定株构建的便捷服务解决方案。
 

参考文献

[1] A. Winters et al. Rapid single B cell antibody discovery using nanopens and structured light, Mabs. 11 (6) 2019.

[2] Tiller T, et al. Single B cell antibody technologies. N Biotechnol. 2008;25(5): 333-7.

[3] E. Waltari et al. Functional Enrichment and Analysis of Antigen-Specific Memory B Cell Antibody Repertoires in PBMCs. Front Immunol. 10 (1452) 2019.

[4] L, Ouisse, Antigen-specific single B cell sorting and expression-cloning from immunoglobulin humanized rats: a rapid and versatile method for the generation of high affinity and discriminative human monoclonal antibodies. BMC Biotechnology. 17(3) 2017.