一、重组蛋白表达简介

重组蛋白（recombinant protein）是指应用重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白表达是指应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因（gene of interest，GOI），连接到适合的表达载体，导入到特定的宿主细胞，利用宿主细胞的遗传系统，表达出有功能的蛋白质分子的技术。

亘安生物的多种重组蛋白表达系统，可提供高纯度、低成本的活性重组蛋白表达服务，满足用户科研及药物开发等多种场景的需求。

二、原理流程

蛋白质表达系统可以分为原核表达系统和真核表达系统两大类。我们拥有多种重组蛋白表达系统，包括细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等蛋白表达系统，为客户提供高品质、低成本的活性重组蛋白，满足您的不同需求。
 

            

大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛，也是最经济实惠的蛋白表达系统。E. coli具有遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点，但由于含有内毒素和易形成包涵体，主要适用于原核和没有翻译后修饰的真核蛋白表达，尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势。

酵母细胞发酵简单、发酵密度高、繁殖快速、成本低廉，易于遗传操作，具有蛋白质翻译后修饰功能，可分泌表达，纯化工艺简单且安全。酵母是真核生物蛋白表达宿主细胞的良好选择，但也存在缺乏强有力受严格调控的启动子，表达量低，发酵时间长，糖基化修饰不正确，多糖浓度高，不利于纯化等不足。

昆虫细胞表达系统具有经济、易于放大培养和高表达水平等优势，是应用较广泛的真核表达系统之一，它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力，可表达非常大的外源性基因(一200kD)，可以同时表达多个外源基因，在分泌蛋白生物活性的同时增加产量，适用于表达一些可能对哺乳动物宿主细胞产生负作用的蛋白，如激酶以及毒性蛋白等。它的主要缺点是外源蛋白表达处于极晚期病毒启动子的调控之下，这时由于病毒感染，会导至细胞死亡。常用的细胞宿主细胞为sf9。

哺乳动物细胞表达系统是复杂糖基化蛋白的表达系统，哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰功能，其表达的重组蛋白在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子，更有可能获得与天然分子相同的生物活性，可分为瞬时、稳定和诱导表达系统，但培养基成本极高，培养周期长，至少一个月以上，培养较困难，表达量较低，构成复杂、操作技术要求高、易发生支原体、病毒污染。常用的宿主细胞有CHO、HEK293、COS、BHK、SP2/0、NIH/3T3等。
 

三、重组蛋白表达的应用

重组蛋白表达技术在生命科学研究、药物研发、诊断工具开发、工业生产以及生物能源研究等领域都有很广泛的应用。

1、重组蛋白药物包括多肽类、蛋白类和抗体类药物的研发；

2、食品、化妆品、酶、生物材料的研发；

3、诊断试剂的研发；

4、抗原制备；

5、蛋白结构功能研究；

6、药物发现筛选。

四、交付内容

1、重组载体；

2、测序报告；

3、质控报告；

4、纯化好的蛋白产品。

五、服务优势

1、多种表达系统可灵活选择；

2、表达规模可根据需要灵活选择；

3、重组蛋白表达成功率高；

4、方便获取从密码子优化、基因合成、载体构建到重组蛋白的表达及纯化的完整解决方案。

参考文献

[1] Belenkaya S. V., et al."Comparison of the Biochemical Properties of Recombinant Alpaca (Vicugna pacos) Chymosins Produced in Pro- and Eukaryotic Expression Systems." Applied Biochemistry and Microbiology 59.5(2023):630-635.

[2] Suo Qian, et al."[Prokaryotic expression, polyclonal antibody preparation, spatio-temporal expression profile and functional analysis of c-Myc of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae)].." Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology 39.7(2023):2730-2742.

[3] Wu Yijian, et al."An outlook to sophisticated technologies and novel developments for metabolic regulation in the Saccharomyces cerevisiae expression system." Frontiers in Bioengineering and Biotechnology 11.(2023):1249841-1249841.